心血管领域上海吉凯基因化学技术有限公司

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技术服务信息

服务名称:心血管领域
服务类别:分子生物学服务 - 病毒转染系统服务
价格:询价
允许参观:协商决定
所在区域:上海.上海
更新时间:2019/7/25 12:26:00
浏览人数:60
诚信指数:805点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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技术服务详细描述

血管领域

心血管疾病是当今威胁人类最严重的疾病之一。使用工具病毒对心血管疾病特定基因进行定向和组织特异性的改造,将为心血管研究提供强大工具。

工具病毒选择指南

心血管系统研究如何挑选合适的工具病毒

慢病毒、腺病毒和腺相关病毒(AAV)等都是常用的工具病毒载体,在心血管系统的研究中该如何选择呢?

1.  慢病毒:慢病毒的优点是可以将靶基因整合入宿主的基因组中持续稳定的表达,引起的免疫反应较为温和。但是其缺点是在体注射时,对心血管系统的细胞(特别是心肌细胞)缺乏特异性的趋向性,实验者往往需要通过心肌注射的方法来实现心肌细胞的转染,而开胸实验的难度较大,易导致动物死亡,因此影响其广泛应用。

2.  腺病毒:许多心血管疾病的研究会使用腺病毒载体进行,因为腺病毒对心肌细胞的感染效果较好,并且靶基因的表达效果较好。但其表达是瞬时的(一般在心肌细胞中可持续1-4周),且易引起较强烈的免疫反应,严重时可导致实验动物死亡。

3.  腺相关病毒AAV:与腺病毒相比,AAV对心肌细胞具有更高的感染效率。运用AAV载体的另一个显著优点是有些AAV血清型,如AAV1、AAV6、AAV8和AAV9等对于心肌细胞具有较高的趋向性,可直接静脉注射感染,不需要复杂危险的开胸手术,因此现有的Ⅱ期临床试验,均使用AAV

了解了这些病毒载体在心血管系统应用中的优势和不足后,如何根据具体的实验需求和基因情况选择合适的病毒载体呢?我们需要考虑这几个方面:

1.  工具载体的表达时间与实验观察时间是否相符;

2.  工具载体可以容纳的片段大小与目的基因大小是否契合;

3.  工具载体对目的细胞、在体组织的转导是否足够高效。


下表总结了常用基因操作工具的选择方法:

                                                                常用基因操作工具选择指南

吉凯小建议:

1.  在体实验建议选择腺相关病毒,它具有滴度高,扩散效果好,免疫原性低等特点。且AAV 1/6/8/9等血清型对心脏均具有较好的亲和性,可直接尾静脉注射感染心脏,不需要复杂危险的开胸手术点击了解更多AAV血清型选择小窍门>>

                                                                               AAV 血清型的趋向性

2.  心肌细胞体外感染建议选择慢病毒或腺病毒:慢病毒在感染原代心肌细胞后2-4 天开始表达,且对心肌细胞的毒性低、损伤小;腺病毒在感染原代心肌细胞后1-2天开始表达,感染效率高,表达快。

3.  如需目的基因在心肌或平滑肌细胞中特异性表达,可使用特异性启动子,如心肌细胞特异性启动子cTnT、心肌细胞早期特异性启动子mNkx2.5及平滑肌细胞特异性启动子SM22a。吉凯提供组织特异性启动子载体的病毒包装服务,点击了解>>

用量参考

心血管系统病毒用量参考

以下表格中为吉凯客户应用文献总结(部分)。更多心血管系统病毒注射参数,点击查看与下载>>

1. 慢病毒


代表文献23Circulation,2016:CIRCULATIONAHA.116.017949.


2. 腺病毒




代表文献24吉凯客户文章Cardiovascular research,2014:cvu007.


3. 腺相关病毒


代表文献

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