肝脏上海吉凯基因化学技术有限公司

银牌供应商 

技术服务信息

服务名称:肝脏
服务类别:分子生物学服务 - 病毒转染系统服务
价格:询价
允许参观:不允许参观
所在区域:上海.上海
更新时间:2019/7/25 13:47:00
浏览人数:64
诚信指数:781点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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上海吉凯基因化学技术有限公司
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上海·上海
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技术服务详细描述

肝脏 

通过使用工具病毒载体介导将外源基因导入靶细胞中,对疾病特定基因进行定向和组织特异性的改造,将为肝脏领域的疾病研究与治疗提供强大工具,如肝硬化、肝纤维化等。

工具病毒选择指南

首先,肝脏研究如何选择合适的病毒载

慢病毒、腺病毒和腺相关病毒(AAV)等都是常用的工具病毒载体,在肝脏研究中如何选择合适的病毒工具呢?


1. 慢病毒:慢病毒具有毒性低、损伤小的特点,且病毒感染细胞后,可以整合入基因组长期表达,是细胞实验的首选。应用于在体注射时,引起的免疫反应较为温和。

2.  腺病毒:腺病毒载体容量大,不整合到染色体中,无插入致突变性。但表达时间短,在大部分细胞中,腺病毒可维持7-14 天的表达时间。且免疫原性高,应用于在体注射时易造成炎症反应。

3.  腺相关病毒AAV:AAV 体积小,滴度高,扩散性好,是在体实验的首选。AAV有多种血清型,不同的血清型对不同的脏器有较高的识别及感染能力,其中AAV2型、8型、9型等对肝脏有较好的趋向性。

了解了这些病毒载体在肝脏研究中的优势和不足后,如何根据实验目的来挑选合适的基因操作工具呢?建议您可以从以下这几个方面出发:

1. 工具载体的表达时间与实验观察时间是否相符;

2. 工具载体可以容纳的片段大小与目的基因大小是否契合;

3. 工具载体对目的细胞、在体组织的转导是否足够高效。

                                                                           常用基因操作工具选择指南

吉凯小建议:

1.  在基因大小允许的前提下,在体实验建议优先选择腺相关病毒(AAV)。AAV具有滴度高,扩散效果好,免疫原性低等特点,且AAV有多种血清型,2型、8型、9型等对肝脏有较好的趋向性。点击了解更多AAV血清型选择小窍门>>

                                                                               AAV 血清型的趋向性

2.  细胞体外感染建议选择慢病毒:慢病毒在感染细胞后2-4 天开始表达,且对细胞毒性低、损伤小。

3.  如需目的基因在肝脏中特异性表达,可使用组织特异性启动子,如肝脏特异性启动子TBG吉凯提供组织特异性启动子载体的病毒包装服务,点击了解>>

注射方法

病毒工具在肝脏中的的注射方法

肝脏常用的注射方法有尾静脉和肝门静脉注射,两种注射方法用量类似。下面以肝原位注射为例详细说明。

1. 腹部切开后,寻找到肝门静脉:将肝叶提起,下面就是门静脉,因为下腔静脉在后方,离肾脏比较近,所以,一般看到的大的静脉就是门静脉。

2. 注射病毒,穿刺后压迫止血。

更多工具病毒体内注射实验操作视频,点击查看>>

用量参考

肝脏注射病毒用量参考

以下表格中注射参数来自吉凯客户发表文献更多肝脏病毒注射参数,点击查看与下载>>

1. 慢病毒

代表文献(31)吉凯客户文章Jourmal of viology,2016,90(4):1729-1740

2. 腺病毒

代表文献(36)吉凯客户文章Laboratory Investigation,2017,97(9):1020
3. 腺相关病毒

表文献(37)吉凯客户文章Cellular physiology and biochemistry,2016,40(5):1117




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