“超级变色龙”CaMPARI2:rAAV-hSyn-CaMPARI2武汉枢密脑科学技术有限公司

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技术服务信息

服务名称:“超级变色龙”CaMPARI2:rAAV-hSyn-CaMPARI2
服务类别:分子生物学服务 - 病毒转染系统服务
价格:3980元
允许参观:允许参与实验
所在区域:湖北.武汉
更新时间:2019/9/16 9:13:00
浏览人数:19
诚信指数:529点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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武汉枢密脑科学技术有限公司
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湖北·武汉
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技术服务详细描述

名称释义:

rAAV: Recombinant adeno-associated virus, 重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体,安全性高(目前还没有发现rAAV对人体致病),免疫原性低(感染后很少被免疫系统所清除),表达时间长。

hSyn:human Synapsin I,成熟神经元特异性启动子。

CaMPARI:calcium-modulated photoactivatable ratiometric integrator

       CaMPARI蛋白在正常状态下会发出绿色荧光(green),而如果对这种蛋白同时使用高浓度钙离子与紫外光处理,它就会不可逆、永久地转变成另一种能发出红色荧光(red)的构象,即实现将瞬间的神经元活动变成永久的红色荧光蛋白表达(图1)。


图1 CaMPARI蛋白变色变色机制

        研究人员通过转基因技术将这种新型蛋白导入到实验动物的神经系统中,然后用高强度的紫外光照射动物的大脑,通过检查荧光,找到发红色荧光的神经元,这些神经元即是在紫外光照射期间活跃的神经元。由于紫外光可以对着整个大脑进行照射,所以理论上,人们可以对全脑进行检查。 CaMPARI对钙离子浓度的变化具有毫秒级的反应速度,且具有非常灵活的靶向性,可以针对性地观测某些特定种类神经元的活动情况。

图2. 在紫外照射期间,一个活跃的神经元(紫红色)和一个不活跃的神经元(绿色)

CaMPARI2.0Eric R. Schreiter团队首先对纯化CaMPARI2.0蛋白进行测试,发现其绿色和红色的荧光强度分别比第一代CaMPARI蛋白高60%和130%。且钙解离速率也提高了数倍,具有更强的敏感性,更激动人心的是在无钙条件下CaMPARI2.0光转化率(PC)比前身大大降低,这意味着在钙离子浓度不同时CaMPARI2.0将表现出更高的对比度。

参考文献
Nat Commun
PMID: 30361563


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