病毒包装赛业(广州)生物科技有限公司

金牌供应商 

技术服务信息

服务名称:病毒包装
服务类别:分子生物学服务 - 细菌菌株构建服务
价格:询价
允许参观:不允许参与实验
所在区域:广东.广州
更新时间:2019/12/2 9:49:00
浏览人数:2161
诚信指数:2435点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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赛业(广州)生物科技有限公司
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广东·广州
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技术服务详细描述

Cyagen目前提供慢病毒包装服务。

   

一、慢病毒包装

 

赛业生物采用第3代重组慢病毒包装系统制备病毒颗粒。为了增加慢病毒的安全性能,病毒制备所必需的元件序列被拆分到4个质粒当中,分别是:

  

1)1个编码目的基因的慢病毒转移质粒。目的基因两侧各有一个LTR(long terminal repeat)序列,LTR序列促使目的基因整合到目的细胞基因组里。为了提高安全性能,转移质粒的3’ LTR缺失了部分序列,使得整合后的病毒基因组失去自我复制能力。
2)2个包装质粒。其中一个质粒编码Rev, 另外一个质粒编码Gag和Pol。
3)1个编码包膜蛋白的质粒。

    

利用上述质粒包装出来的重组慢病毒颗粒,被称为自我失活VSV-G假型慢病毒(self-inactivating VSV-G pseudotyped lentivirus)。

   

首先将转移质粒、包装质粒和包膜蛋白质粒转染到293T细胞。更换新鲜的培养基后,继续培养48~72小时。收集培养液,进行离心浓缩后,就可得到转导细胞级别的病毒颗粒。如果您想获得注射动物级别的超纯病毒颗粒,可以利用蔗糖超速离心进一步去除杂质,从而获得纯度更高的病毒颗粒。

    

 

二、CRISPR慢病毒包装

    

CRISPR/Cas9慢病毒系统可对基因组的特定位点进行精确编辑。其原理是核酸内切酶Cas9蛋白通过导向性RNA(guide RNA,gRNA)识别特定基因组位点并对双链DNA进行切割,从而实现细胞水平单基因或多基因敲除。CRISPR慢病毒缩短实验周期的同时,更能快速得到实验结果,省时省力。

   

 

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