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ChIP-qPCR技术服务上海康成生物工程有限公司

技术服务信息

服务名称:ChIP-qPCR技术服务
服务类别:分子生物学服务 - 实时定量PCR服务
价格:询价
允许参观:不允许参与实验
所在区域:上海.上海
更新时间:2018/11/14 9:52:00
浏览人数:4150
诚信指数:972点
了解更多:进入公司展台
使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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供应商联系卡

上海康成生物工程有限公司
地址:
上海市宜山路700号C2栋3楼 (200233)
邮编:
200233
电话:
800-820-5058/ 400-886-5058(免费热线);021-64451989
传真:
021-64452021
联系人:
market@kangchen.com.cn
所在区域:
上海·上海
邮件:
公司展台:
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技术服务详细描述

     康成生物提供ChIP-qPCR服务,能够检测特定转录因子/组蛋白修饰与已知基因启动子区域的结合;在已知启动子范围内寻找特定转录因子/组蛋白修饰的结合位点。

    ChIP-qPCR完美结合了ChIP技术和实时定量PCR技术。ChIP技术利用抗体特异性富集与特定转录因子/组蛋白修饰结合的DNA片段;qPCR技术使用SYBR荧光染料,非特异性的掺入DNA双链,发射荧光,保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步,最后利用Ct值进行定量分析。ChIP-qPCR能够专一,灵敏,快速,高重复地定量生物样品中特定转录因子/组蛋白修饰与已知基因启动子的结合。
 
ChIP-qPCR技术特点:
    · 高特异性,针对感兴趣的基因启动子设计特异性的实时荧光定量PCR引物;
    · 超宽的线性范围,可跨越7个数量级;
    · 精确度高,重复性好;
    · 灵敏度高
 
康成生物ChIP-qPCR技术服务流程:
    A. 样品交联,甲醛处理细胞,交联DNA与DNA结合蛋白
    B. 超声打断染色质,裂解细胞,并以超声波将染色质打断成400-500bp的片段
    C. 染色质免疫共沉淀,将B所得片段分成两份,一份与特异性抗体进行免疫共沉淀(ChIP),另一份作为Total input样品
    D. DNA纯化,将C所得两份蛋白-DNA复合物解交联,纯化分离DNA片段。ChIP富集的DNA片段(ChIP DNA),Total input样品中的DNA片段(Total input DNA)
    E. 实时荧光定量PCR检测

 
实验数据处理
  ● Total input DNA样品作为模板,用待测基因特异性引物进行qPCR,检测得到Ct值(Input)
  ● ChIP DNA样品作为模板,用待测基因特异性引物进行qPCR,检测得到Ct值(ChIP)
  ● 待测基因免疫共沉淀的效率(ChIP / Total input)可通过以下公式计算:
    %(ChIP / Total input) = 2^[ Ct (Input)- Ct (ChIP) ] * 100
 
 
 
 
 
 

上海康成生物工程有限公司 
地址:上海市漕河泾高新技术开发区虹漕路42163号楼2 
免费热线:400-886-5058 ; 800-820-5058(座机)
电话:021-64451989         传真:021-64452021
网址:www.kangchen.com.cn

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