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基因敲入服务上海南方模式生物科技发展有限公司

技术服务信息

服务名称:基因敲入服务
服务类别:实验动物服务 - 转基因动物定制服务
价格:询价
允许参观:协商决定
所在区域:上海.上海
更新时间:2016/4/12 10:42:00
浏览人数:2010
诚信指数:110点
了解更多:进入公司展台
使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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上海南方模式生物科技发展有限公司
地址:
上海市金科路3577号2号楼
邮编:
201203
电话:
400-728-0660
传真:
021-61637610
联系人:
张小姐
所在区域:
上海·上海
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技术服务详细描述

 

基因敲入(Knockin)

基因敲入(Knockin)是在目的基因位置引进特定的突变或外源基因,比如在目的基因引入点突变(模拟人类遗传疾病模型),或将报告基因(如EGFP、RFP、mCherry、YFP、LacZ、Luciferase等)或需要表达的功能性cDNA(如Cre、Dre等)通过同源重组的方式引入目的基因的特定位点,从而使报告基因或其他cDNA的表达与目标基因的表达一致。若用报告基因或cDNA取代小鼠本身的基因,则敲除和敲入同时发生。将人源基因替换小鼠内源基因或将人源cDNA插入到小鼠内源基因ATG位置,还可定制人源化小鼠模型。

I    ES细胞同源重组技术途径

原理    构建在目标DNA序列位置插入外源cDNA的打靶载体,转入ES细胞,通过同源重组获得Knockin片段重组到基因组指定位置上的ES细胞,经囊胚注射、嵌合鼠繁殖,最终获得Knockin杂合子小鼠。
 
服务周期    9-16个月
 
 

II   Crispr/Cas9技术途径
 
原理    根据基因序列设计合成sgRNA,针对Knockin插入点或点突变位置构建含Knockin片段或点突变的同源序列,与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵胞质,Cas9核酸酶、sgRNA、基因组靶序列结合并切割双链DNA,以含Knockin的同源序列为模版修复基因组DNA,最终获得在目的DNA序列插入Knockin片段或点突变的Knockin小鼠。
 
服务周期    6-9个月
 

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