神经系统上海吉凯基因化学技术有限公司

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技术服务信息

服务名称:神经系统
服务类别:分子生物学服务 - 病毒转染系统服务
价格:询价
允许参观:协商决定
所在区域:上海.上海
更新时间:2019/7/25 15:21:00
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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技术服务详细描述

神经系统

神经科学是近年来快速发展的前沿学科,以病毒载体为介导的机制研究、基因治疗及神经环路是神经研究的热点。

工具病毒选择指南

作为神经系统研究的关键工具,病毒载体具有感染效率高、操作方便等优势,比较常用的病毒载体包括腺相关病毒、慢病毒、腺病毒等,如何根据自己的实验需求选择合适的病毒载体呢?

1.  慢病毒:慢病毒对原代神经元细胞感染效率高、毒性低、损伤小,在感染后 2-4 天开始表达,并且可以长时间稳定表达外源基因,因此原代神经元细胞感染,通常首选慢病毒。在体注射时,慢病毒的优点是可以将靶基因整合入宿主的基因组中持续稳定的表达,且引起来的免疫反应温和,可用于定点注射。

2.  腺病毒:神经领域的研究较少使用腺病毒载体进行,因其易引起较强烈的免疫反应,严重时可导致实验动物死亡。
3.  腺相关病毒(AAV):与慢病毒相比,AAV体积小,滴度高,扩散性好,且具有更强的嗜神经特性。运用AAV载体的另一个显著优点是有些AAV血清型,如PHP.eB,可穿过血脑屏障、胎盘屏障,可通过尾静脉注射使用。此外AAV1,AAV Retro等血清型还可用于神经环路标记。

了解了这些病毒载体在神经系统应用中的优势和不足后,如何根据具体的实验需求和基因情况选择合适的病毒载体呢?我们需要考虑这几个方面:

1. 工具载体的表达时间与实验观察时间是否相符;

2. 工具载体可以容纳的片段大小与目的基因大小是否契合;

3. 工具载体对目的细胞、在体组织的转导是否足够高效。


下表总结了常用基因操作工具的选择方法:


吉凯小建议

1.  在体实验建议选择腺相关病毒,它具有滴度高,扩散效果好,免疫原性低等特点。且AAV 1/2/5/8/9/retro/ PHP.eB/ PHP.S 等血清型对神经系统均具有较好的亲和性,如1型可作为顺行示踪跨单突触标记的血清型使用 、9型可作为顺行示踪非跨突触标记的血清型使用、Retro可作为逆向示踪非跨突触标记的血清型使用。 PHP.eB,适合中枢神经系统,可穿过血脑屏障、胎盘屏障,常通过尾静脉注射使用;PHP.S,适合周围神经系统,可穿过血脑屏障、胎盘屏障,常通过尾静脉注射使用。


2.  原代神经元体外感染建议选择慢病毒:慢病毒在感染原代神经元后2-4 天开始表达,且对神经元细胞的毒性低、损伤小。

3.  如需目的基因在某一类神经元或胶质细胞中特异性表达,可使用特异性启动子。吉凯提供组织特异性启动子载体的病毒包装服务,点击了解>>



用量参考

神经系统病毒用量参考
以下表格中为吉凯客户应用文献总结(部分)。更多神经系统病毒注射参数,点击查看与下载>>

1. 腺相关病毒AAV


2. 慢病毒



代表文献 (1)吉凯客户文章 Naturen medicine,2010,16(12):1439-1443

3. 腺病毒


代表文献 (14)吉凯客户文章 Brain,Behavior,and lmmunity,2017

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