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TUNEL、caspase3/7细胞凋亡检测上海吉凯基因医学科技股份有限公司

银牌供应商 

技术服务信息

服务名称:TUNEL、caspase3/7细胞凋亡检测
服务类别:细胞生物学服务 - 细胞毒性测试服务
价格:欢迎来电洽询
允许参观:协商决定
所在区域:上海.上海
更新时间:2021/9/14 16:42:00
浏览人数:1189
诚信指数:1051点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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上海吉凯基因医学科技股份有限公司
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上海市浦东新区张江高科技园区爱迪生路332号
邮编:
201203
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4006210302
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上海·上海
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技术服务详细描述

 

TUNEL、caspase3/7细胞凋亡检测


服务流程


 

 


服务说明

 

TUNEL检测细胞凋亡

      TUNEL是一种经典的细胞凋亡检测方法,凋亡细胞会发生DNA双链断裂,从而在断裂处暴露出3’-OH基团,利用荧光/化学基团标记的dUTP3’OH基团结合后,可通过荧光成像/染色反应指示凋亡细胞。


技术原理

      细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。


吉凯应用实例


      用待研基因shRNA慢病毒感染A549细胞,TUNEL染色,结果显示,shRNA下调目的基因表达后,凋亡细胞显著增多,表明待研基因与A549细胞凋亡显著相关。



Caspase3/7检测细胞凋亡

    Caspase3/7 的活性是细胞凋亡指示剂,通过检测其活性强弱,判断细胞凋亡情况。


技术原理

       Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。


吉凯应用实例

       用待研基因shRNA慢病毒感染A549细胞,Caspase3/7活动检测,结果显示,shRNA下调目的基因表达后,Caspase3/7活性显著增强,表明待研基因与A549细胞凋亡显著相关。

       


上海吉凯基因医学科技股份有限公司

地址:上海张江高科技园区爱迪生路332 邮编:201203 

客服热线:400-621-0302
邮箱: service@genechem.com.cn
售前顾问: 18516626958; 18939810765; 18516626959
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