MTT与细胞增殖毒性分析广州朗日生物技术有限公司

技术服务信息

服务名称:MTT与细胞增殖毒性分析
服务类别:细胞生物学服务 - 细胞毒性测试服务
价格:询价
允许参观:不允许参与实验
所在区域:广东.广州
更新时间:2011/5/6 15:14:00
浏览人数:6572
诚信指数:57点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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广州朗日生物技术有限公司
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技术服务详细描述

MTT(噻唑兰 )法

    原理:活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物,并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。DMSO能溶解细胞中的蓝紫色结晶物,用酶联免疫检测,以在490nm波长处测定其吸光度,可间接反映活细胞数。在一定细胞数范围内,MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。此法已经广泛应用在一些生物活性因子的活性检测、 抗肿瘤药物的筛选、细胞毒性试验和肿瘤***敏感性的测定等。

    注意事项:用此法测细胞活力,为保证结果的准确性,最好在试验前测定每种细胞的贴壁率,倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,再确定每孔细胞接种数和培养时间,以保证培养终止时不会过满。另外,实验时注意: 

1)   细胞数:根据各细胞生长时间和速度及药物作用时间种合适的细胞数

2)   血清:测定细胞因子等对细胞生长影响时需要采用低浓度血清或无血清

3)   空白对照:设置药物刺激的空白对照,并作为比色的空白调零

4)   药物介质对照:派出药物溶解介质的干扰需同时加入药物介质对照

   

                      

                                      

图:考虑以上注意因素并排出后,根据不同药物浓度得出两种药物的抑制率曲线及方程,最后得出每种药物作用的IC50(抑制率为50%)点的药物浓度。

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