免疫组化实验武汉博士德生物工程有限公司

技术服务信息

服务名称：免疫组化实验
服务类别：免疫学服务 - 免疫组化/免疫沉淀/Western blot
价格：询价
允许参观：不允许参观
所在区域：湖北.武汉
更新时间：2010/3/29 11:53:00
浏览人数：13243
服务商：武汉博士德生物工程有限公司
诚信指数：469点
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使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床
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武汉博士德生物工程有限公司
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武汉市关山二路特1号国际企业中心3号楼（聚贤楼）B座5楼
邮编：
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传真：
027-67845936
联系人：
王
所在区域：
湖北·武汉
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技术服务详细描述

石蜡组织标本处理过程
石蜡组织标本处理过程
 
1．  取材：将动物（如大小鼠）断颈处死后迅速取出所要组织，然后裁成大小为(1cm×1cm×0.5cm)剔除组织上的脂肪和钙化，将组织放入PBS缓冲液中洗涤（直至组织上无血渍为止）
2．  固定：将组织置于4%多聚甲醛固定液中4℃固定，固定时间和组织厚度成正比（每1mm一小时）
3．  脱水：固定后的组织经PBS缓冲液洗涤后（浸泡30分钟×3次）放入乙醇中4度剃度脱水
1)         70%乙醇 4℃ 3～4h
2)         80%乙醇 4℃ 3～4h
3)         90%乙醇 4℃2～3h
4)         95%乙醇Ⅰ 4℃ 2～3h
5)         95%乙醇Ⅱ 4℃ 1～2h
6)         100%乙醇Ⅰ 4℃ 1.5h
7)         100%乙醇Ⅱ 4℃ 1.5h
8)         二甲***Ⅰ 4℃ 0.5～1h
9)         二甲***Ⅱ 4℃ 0.5１～1h
10)      石蜡Ⅰ 60℃ 1h
11)      石蜡Ⅱ 60℃ 2h
　　以上全过程为18-24h，也可在室温内使用自动脱水机代替。如组织块小，直径小于0.5cm，可用快速石蜡包埋切片，全过程只需4h左右。有些组织在切片时易碎（如肝脏），在脱水时可适当缩短脱水时间
4浸蜡：将组织浸入液态石蜡中（2小时×2次）严格控制浸蜡温度（60—65℃为宜），防止温度过高导致组织蛋白丢失。
5模具包埋：待蜡完全凝固后4℃保存
6切片：要求刀片锋利，切片时尽量避免刀痕与皱折，切片投入50℃左右水浴中，若展片困难时可适度加入几滴乙醇，待完全展开后将其黏附在玻片中央。
7烤片： 60℃烤片30分钟，或37℃恒温箱过夜..烤完后切片标本可长期保存

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