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Nunc细胞培养产品常见问题解答

作者:北京华美转导科技有限公司 2008-01-22T00:00 (访问量:3641)

什么类型的细胞系可以在NUNC Lab-Tek 腔室载玻片、培养皿、培养瓶和盖玻片上生长?

大部分贴壁细胞系和纤维细胞系都可以在NUNC细胞培养产品上良好生长,而且原代细胞也能很好的在NUNC细胞培养产品上生长。

什么原因可能导致细胞生长不良和粘附较差?

很多因素都可能导致细胞生长不良和粘附较差,其中有细胞类型、细胞代龄、培养条件、培养环境、营养成分、毒素、细胞培养步骤、细胞处理和表面选择等。细胞培养中细胞系代龄和传代次数将是非常重要的参数,传代次数表示细胞被再培养的次数。一些细胞经过几次的传代,细胞形态可能发生变化。随着细胞传代老化,细胞最后就会停止分裂生长,同时随着细胞培养时间的延长细胞可能发生自传染导致细胞变异。

细胞培养过程中的胰酶处理会损坏细胞膜,使细胞的粘附性和丛生化等变差, 时间延长内毒素也会积累,营养物质降低,培养条件的轻微变化都会导致细胞生长变差。

那些原因会导致在显微镜下观察细胞时得不到好的实验结果?

指印和油污染镜头是导致观察结果不良的最普通的原因,使用显微镜前将物镜清洗干净并一直浸入油中十分必要,特别使用油镜浸入时使用专门品牌的观察用油非常重要。

盖玻片和载玻片的选择不当也可能导致较差的试验结果,推荐使用No. 1 和 No. 1.5硼酸玻璃盖玻片能得到最佳效果。使用塑料载玻片由于玻璃和塑料折射率的不同在较高放大倍数下也可能影响实验结果,玻璃的厚度对能否得到较好观察图片也非常重要,例如No. 2圆盖玻片如果要得到高质量图片就显得太厚了。参考显微镜说明书查找最佳耗材配置。

The coverslipping procedure may affect resolution. A clear seal is required, free of debris and particles. When performing oil immersion, bubbles may result in poor resolution under high magnification.

什么因素可能导致细胞系不能在NUNC培养产品上生长?

好多因素都可能影响细胞的粘附和生长,细胞生长较差可能是一下因素中的一种或者多种:

  • 培养条件例如温度、培养基pH值、湿度和CO2 和O2 浓度;
  • 微生物的污染(细菌、酵母和霉菌),抗生物使用可以降低污染几率。细胞也可能被一些看不见的物质污染,病毒和支原体是最为常见的,而且支原体的监测是非常困难的,所以使用血清必须向有无支原体认证的企业购买;
  • 培养基的成分对有些细胞系可能也是有毒性;
  • 培养器皿上的去污剂残留也可能影响细胞的粘附,去污剂残留可能是有毒性的,导致细胞膜或者细胞蛋白的溶解;
  • 有些细胞需要额外的基质来促进生长,包括胶原、昆布安酸、粘连蛋白和聚赖氨酸等。有些细胞系需要加入额外的细胞因子例如细胞色素和神经生长因子;
  • 查阅细胞库中获取细胞系的特殊信息。

原代细胞培养中什么原因可能导致细胞死亡?

原代细胞比移植细胞更为脆弱,因为细胞必须从周围的组织中抽提出来,消化酶选择、消化时间长短和酶的去除对细胞活力和健康程度都非常重要。

NunclonΔ表面都经过了什么试剂包被?

Nunc细胞培养瓶、培养板、培养皿、多孔板、Permanox Lab-Tek 腔室玻片和培养管没有经过任何生化试剂包被,NunclonΔ表面是经过特殊表面修饰,增强了细胞的粘附性和细胞生长能力。

Nunc细胞刮刀刀刃是柔软的还是刚性的?是由什么材料做成?

Nunc细胞刮刀是刚性的,由聚乙烯制成,铰链处可以根据客户使用情况调整成不同角度,可以刮搽细胞。

Nunc细胞刮刀能否在NunclonΔ三层细胞瓶中使用?

不能,三层细胞培养瓶的不是为机械刮搽设计,但是细胞也是非常容易收获,可以通过胰酶、胶原酶、蛋白酶或者非酶溶液处理细胞,具体请参看Tech Note Vol. 1 No. 2 关于Nunclon Δ TripleFlask细胞培养技术手册。

 

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